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多种真菌毒素专用柱液质质法 一步通过法SPE柱净化谷物类

发布时间:2022-08-25      点击次数:216

真菌毒素为真菌增殖时产生的次生有毒代谢产物。

真菌的孢子能透过空气、风力、水流和动物等方式来传播。只要有少量蛋白质、淀粉、脂质及水份,就是适合真菌生长的环境,因此谷物、果实类、玉米及花生都是真菌主要生长处。

 

黄曲毒素具有潜在性的肝毒害(hepatoxin)及致癌性,其性质稳定,因此真菌毒素易出现在食物链中;除了直接食用被真菌毒素污染的食物,也可能透过饲料让动物生病。

 

真菌毒素污染食品和饲料对于全球性作物及动物养殖业影响很大。

据估计每年约25%农作物受到不同程度的真菌毒素污染,以美国和加拿大而言,真菌毒素造成饲料业和家畜业每年损失约50亿美金(IFST, 2006)

 

本篇应用以FaTEx-gen快速净化萃取净化柱进行前处理,使用LC-MS/MS分析11种真菌毒素的含量, 包含黄曲毒素类、赭曲毒素A及镰孢菌毒素类(伏马毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素)、玉米赤霉毒素等),建立一套快速准确的检测方法,利于维护饲料质量及相关作物食品安全。

 

搭配ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱及Agilent 6470液相层析串联式质谱仪,检测谷物、黄豆及花生等基质。

 

样品制备流程如下:

 

样品秤样后加标静置,加入12mL萃取溶液,高速震荡机震荡30分钟,于3500rpm离心5分钟,得到上清液。

取一定量的上清液通过FaTEx-gen SPE柱净化,氮吹回溶后上机到LC-MSMS分析。

 

分析结果如表三所示,回收率落在81.9~112.7%范围内,CV%皆小于20,显示此为一快速、稳定之检验方法。

 

前处理步骤和仪器分析条件,欢迎索取。

产品信息:FaTEx-gen  真菌毒素专用SPE柱       巨研科技     50/

 

2、霉菌毒素11项药剂之添加浓度

分析物

中文名称 

添加浓度(ng/g)

Aflatoxin B1

黄曲霉素 B1

2.5

Aflatoxin B2

黄曲霉素 B2

2.5

Aflatoxin G1

黄曲霉素 G1

2.5

Aflatoxin G2

黄曲霉素 G2

2.5

Ochratoxin A

赭曲霉毒素 A

2.5

T-2 toxin

T-2毒素

5

HT-2 toxin

HT-2毒素

5

Deoxynivalenol

呕吐毒素

25

Zearalenone

玉米赤霉烯酮

25

Fumonisin B1

伏马毒素 B1

100

Fumonisin B2

伏马毒素 B2

100

 

3、谷类样品中11项霉菌毒素之回收率和变异系数

中文名称

英文名称

黃豆

花生

CV%

R%

CV%

R%

黄曲霉素 B1

Aflatoxin B1

2.3

108.5

9.0

97.5

黄曲霉素 B2

Aflatoxin B2

3.7

105.0

2.4

98.2

黄曲霉素 G1

Aflatoxin G1

2.6

105.4

2.0

102.9

黄曲霉素 G2

Aflatoxin G2

3.4

107.4

4.0

103.0

赭曲霉毒素 A

Deoxynivalenol

4.8

100.3

1.6

103.9

T-2毒素

Fumonisin B1

8.1

90.3

6.1

89.0

HT-2毒素

Fumonisin B2

13.5

81.9

5.3

96.7

呕吐毒素

HT-2 toxin

9.1

109.7

13.4

100.4

玉米赤霉烯酮

Ochratoxin A

2.8

101.9

3.8

106.0

伏马毒素 B1

T-2 toxin

5.9

110.1

5.6

112.7

伏马毒素 B2

Zearalenone

8.1

108.6

5.0

94.4

*重复性,n=3

 

结论:

1、本篇以FaTEx-gen萃取净化套组搭配ZORBAX Eclipse Plus C18管柱于液相串联质谱之分析方法,检测谷类样品(黄豆及花生)之多重霉菌毒素(黄曲毒素类、赭曲毒素A及镰孢菌毒素类)共11项,每次分析时间13分钟,为快速准确的检验方法。

2、 FaTEx-gen萃取净化套组可针对复杂检体基质加强净化,降低基质干扰。

3、 FaTEx-gen套组检测添加多重毒素标准品之谷类样品(添加浓度:黄曲霉素B1 Aflatoxin B1,黄曲霉素B2  Aflatoxin B2,  黄曲霉素G1  Aflatoxin G1,  黄曲霉素G2 Aflatoxin G2,赭曲霉毒素 A  Ochratoxin A2.5 ng/gT-2 toxin, HT-2 toxin5 ng/g;呕吐毒素Deoxynivalenol, 玉米赤霉烯酮 Zearalenone25 ng/g;伏马毒素 B1  Fumonisin B1,伏马毒素 B2  Fumonisin B2100 ng/g)回收率落在81.9~112.7%范围内,变异系数皆小于20,为稳定之检验方法。 

 

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