当今较普遍的前处理方法为固相萃取法(SPE柱法),处理一批样品至少需数小时且需使用大量溶剂冲堤净化;另有不少学者采用QuEChERs法进行前处理,亦有很好的结果可供参考。
巨研科技公司以高效能绿色前处理技术为目标,研发出一种应用于食品中兽药残留检验的快速萃取前处理技术—FaVEx(Fast Veterinary Extraction),为快速的兽药残留检验前处理技术,此技术结合了一支ZL净化管(SPE柱)加上简化的萃取步骤,达到节省时间与溶剂用量、操作简单及再现性佳之效果,并基于鸡蛋样品的特性,发展出FaVEx-NM-Egg快速萃取净化套组應用於鸡蛋基质中多重兽药残留量分析 。
本研究以FaVEx-NM-Egg SPE柱(一步通过法获取目标物)分析鸡蛋样品中多种兽药,与传统兽药残留前处理技术相比,样品前处理整体效率可提高10倍以上,因操作更简单,不须精密设备辅助,人力成本减少90%,有机溶剂的使用减少约90%,同时减少了废弃物的产生。
此方法适用于鸡蛋、蛋粉等鸡蛋产品。
本篇搭配Agilent 6470液相色谱-三重四极杆质谱联用仪,同时检测添加浓度为5.0 ng/g、12.5 ng/g之鸡蛋样品中离子型抗球虫药等102项兽药残留,本篇定量极限可达5 ng/g,为快速、稳定之检验方法。
分析结果如表所示,除Florfenicol(氟苯尼考)及lasalocid A(拉沙里菌素A)之外,其余100项药项回收率均在50~120%范围内,变异系数(CV)介于0.1~21.6之间。
Item | Compound Name | 中文名称 |
1 | 5-Hydroxythiabendazole | 5-羟基噻苯达唑 |
2 | Albendazole | 阿苯达唑 |
3 | Albendazole-Sulfone | 阿苯达唑砜 |
4 | Albendazole-Sulfoxide | 阿苯达唑亚砜 |
5 | Amino albendazole sulfone | 阿苯达唑氨基砜 |
6 | Amprolium | 氨丙啉 |
7 | Azaperol | 氮哌醇 |
8 | Azaperone | 氮哌酮 |
9 | Carazolol | 卡拉洛尔 |
10 | Carbadox | 卡巴氧 |
11 | Chloramphenicol | 氯霉素 |
12 | Ciprofloxacin | 环丙沙星 |
13 | Clarithromycin | 克拉霉素 |
14 | Clindamycin | 克林霉素 |
15 | Clopidol | 氯羟吡啶 |
16 | Cyromazine | 灭蝇胺 |
17 | Danofloxacin | 达氟沙星 |
18 | DCBX | 脱氧卡巴氧 |
19 | Decoquinate | 癸氧喹酯 |
20 | Diclazuril | 地克株利 |
21 | Dicyclanil | 环虫腈 |
22 | Difloxacin | 双氟沙星 |
23 | Dimetridazole | 地美硝唑 |
24 | Enrofloxacin | 恩诺沙星 |
25 | Eprinomectin-Na | 依普菌素 |
26 | Febantel | 非班太尔 |
27 | fenbendazole | 苯硫咪唑 |
28 | Fleroxacin | 氟洛沙星 |
29 | Florfenicol amine | 氟苯尼考胺 |
30 | Florfenicol | 氟甲砜霉素 |
31 | Fluazuron | 吡虫隆 |
32 | Flubendazole | 氟苯咪唑 |
33 | Flumequine | 氟甲喹 |
34 | Furaltadone | 呋喃它酮 |
35 | Furazolidone | 呋喃唑酮 |
36 | Halofuginone | 卤夫酮 |
37 | Josamycin | 交沙霉素 |
38 | Kitasamycin | 吉他霉素 |
39 | lasalocid A | 拉沙洛菌素 |
40 | Levamisole | 左旋咪唑 |
41 | Lomefloxacin | 洛美沙星 |
42 | Maduramycin | 马杜霉素 |
43 | Marbofloxacin | 马波沙星 |
44 | Mebendazole | 甲苯咪唑 |
45 | Metronidazole | 甲硝唑 |
46 | Monensin | 莫能菌素 |
47 | Morantel | 甲噻吩嘧啶 |
48 | Nalidixic acid | 萘啶酮酸 |
49 | Narasin | 那拉霉素 |
50 | Neospiramycin I | 新螺旋霉素 |
51 | Nicarbazin | 尼卡巴嗪 |
52 | Nitrovin | 双呋脒腙 |
53 | Norfloxacin | 诺氟沙星 |
54 | Novobiocin | 新生霉素 |
55 | Ofloxacin | 氟嗪酸 |
56 | Olaquindox | 喹乙醇 |
57 | Oleandomycin | 竹桃霉素 |
58 | Orbifloxacin | 奥比沙星 |
59 | Ormetoprim | 奥美普林 |
60 | Oxfendazole-Sulfone | 磺唑氨酯 |
61 | Oxolinic acid | 恶喹酸 |
62 | Pefloxacin | 培氟沙星 |
63 | Pipemidic acid | 吡哌酸 |
64 | Piromidic acid | 吡咯酸 |
65 | Pyrimethamine | 乙胺嘧啶 |
66 | Robenidine | 氯苯胍 |
67 | Ronidazole | 罗硝唑 |
68 | Salinomycin | 沙利霉素 |
69 | Sarafloxacin | 沙拉沙星 |
70 | Spiramycin I | 螺旋霉素 I |
71 | Succinylsulfathizole | 琥珀酰磺胺噻唑 |
72 | Sulfabenzamide | 磺胺苯酰 |
73 | Sulfacetamide | 磺胺醋酰 |
74 | Sulfachlorpyridazine | 磺胺氯哒嗪 |
75 | Sulfaclozine | 磺胺氯吡嗪 |
76 | Sulfadiazine | 磺胺嘧啶 |
77 | Sulfadimethoxine | 磺胺二甲氧嘧啶 |
78 | Sulfadoxine | 磺胺多辛 |
79 | Sulfaethoxypyridazine | 磺胺乙氧化吡嗪 |
80 | Sulfaguanidine | 磺胺脒 |
81 | Sulfamerazine | 磺胺甲基嘧啶 |
82 | Sulfameter | 磺胺对甲氧嘧啶 |
83 | Sulfamethazine | 磺胺二甲基嘧啶 |
84 | Sulfamethizole | 磺胺甲二唑 |
85 | Sulfamethoxazole | 磺胺甲基异恶唑 |
86 | Sulfamethoxypyridazine | 磺胺甲氧嗪 |
87 | Sulfamonomethoxine | 磺胺间甲氧嘧啶 |
88 | Sulfapyridine | 磺胺吡啶 |
89 | Sulfaquinoxaline | 磺胺喹恶啉 |
90 | Sulfathiazole | 磺胺噻唑 |
91 | Sulfatroxazole | 磺胺曲沙唑 |
92 | Sulfisomidine | 磺胺二甲异嘧啶 |
93 | Sulfisoxazole | 磺胺异恶唑 |
94 | Tetramisole | 四咪唑 |
95 | Thiabendazole | 噻苯唑 |
96 | Thiamphenicol | 甲砜霉素 |
97 | Tiamulin | 泰妙菌素 |
98 | Tilmicosin | 替米考星 |
99 | Trichlorfon | 敌百虫 |
100 | Trimethoprim | 甲氧苄啶 |
101 | Tylosin | 泰乐菌素 |
102 | Virginiamycin M1 | 维吉尼亚霉素M1 |
(一) 样品制备流程
1.1 耗材与试剂
1%醋酸乙腈、无水硫酸钠、高速振荡机、离心机、FaVEx-NM-egg SPE柱、手压或正压压柱机、浓缩仪、0.22um的滤膜。
1.2 前处理操作步骤
1.3 注意事项
1、 FaVEx-NM-egg SPE柱需要与10mL的一次性塑料注射器配合使用。
2、 正压净化*:搭配正压压柱机使用,批量压柱6只FaVEx-NM-egg净化柱。
3、 *回溶液:甲醇/水 ( V / V = 6 / 4 )溶液。
4、**待测物LOQ要求较低时,可取滤液浓缩2-10倍;最大浓缩倍率:取5mL滤液,浓缩至近干后以500µL的回溶液回溶)。
5、推荐使用HPPE-48高通量真空加热振荡浓缩仪,快速自动浓缩到近干,不放通风橱也没有异味,或氮吹浓缩仪等同等功能的浓缩设备。
(二) 液相层析参考条件
移动相流速:0.3 mL/min
层析管柱:ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18
内径3.0 × 150mm 1.8-Micron
流动相溶液-A液:水+0.1%甲酸
流动相溶液-B液:甲醇+0.1%甲酸
流动相溶液:A液与B液以下列条件进行梯度分析
分析仪器:1290/6470液相色谱-三重四极杆质谱联用仪(Agilent)
*回溶液:甲醇/水( V / V = 6 / 4 )溶液
时间(min) | A(%) | B(%) |
0.0 | 98 | 2 |
2.5 | 95 | 5 |
3.5 | 80 | 20 |
6.0 | 75 | 25 |
8.0 | 70 | 30 |
11.5 | 50 | 50 |
13.0 | 30 | 70 |
14.0 | 10 | 90 |
14.5 | 5 | 95 |
20.0 | 5 | 95 |
24.0 | 98 | 2 |
post time:4.0 min
表一、兽药102项药剂之多重反应侦测模式参数
图一、鸡蛋样品之102项多重兽药LC/MS/MS-MRM图谱(添加样品浓度为5.0 ng/g)
图二、鸡蛋样品之102项多重兽药LC/MS/MS-MRM图谱(添加样品浓度为12.5 ng/g)
表二、以FaVEx-NM-Egg净化鸡蛋样品萃取液之多重兽药102项药剂之回收率
和变异系数
(添加5.0 ng/g、12.5 ng/g于鸡蛋样品)
(三) 结论
本研究以FaVEx-NM-Egg SPE柱分析鸡蛋样品中多种兽药,与传统兽药残留前处理技术相比,样品前处理整体效率可提高10倍以上,因操作更简单,不须精密设备辅助,人力成本减少90%,有机溶剂的使用减少约90%,同时亦减少了废弃物的产生。
鸡蛋基于本身基质特性与一般禽畜肌肉类样品差异较大,FaVEx-NM-Egg SPE柱针对鸡蛋类样品提供更好的净化及萃取效果,此方法适用于鸡蛋、蛋粉等鸡蛋产品。
本篇搭配Agilent 6470液相色谱-三重四极杆质谱联用仪,同时检测添加浓度为5.0 ng/g、12.5 ng/g之鸡蛋样品中离子型抗球虫药等102项兽药残留(项目列表详见表)。 分析结果除Florfenicol(氟苯尼考)及lasalocid A之外,其余100项药项回收率均在50~120%范围内,变异系数介于0.1~21.6之间。本篇定量极限可达5 ng/g,为快速、稳定之检验方法。
另有FaVEx-NM-egg净化鸡蛋基质,检测多种农药的药剂清单,欢迎联络询问。
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